Molekylærbiologer rutinemessig plassere fragmenter av DNA - plasmider - som inneholder gener av interesse til bakterier . Dette er en enkel måte for å replikere og produsere mer av genet, og /eller generere genets produkt, som kan være noe som insulin. Electroporation
Electroporation er en metode for å få plasmid inn bakterier. Bakterier og DNA blandes i et rør, og utsettes for et elektrisk felt som produseres av en maskin elektroporering . Det elektriske felt punches små hull i bakterier , slik at DNA inn i cellene. Bakterier som tar opp DNA mest effektivt er electrocompetent celler .
Metode
Electrocompetent bakterier som E. coli kan produseres gjennom en serie av gjentatte sentrifugering , først til fjerne deres vekst medium og erstatte den med ultra -rent vann , og til slutt å erstatte vannet med glyserol . I de siste trinnene bakteriene resuspendert i et lite volum av glycerol , delt inn i rør, frosset i flytende nitrogen og lagres lang sikt i en -80 grader Celsius ( -112 grader Fahrenheit ) fryser .
Hensyn
Denne protokollen gjøres vanligvis med store volumer som krever store kolber , agitatorer og sentrifuger . Det er viktig at trinnene fra innhøsting til lagring alle utføres på iskalde temperaturer. Ultra -rent vann må brukes .