Lyset produsert av ildfluer er blitt et viktig verktøy for molekylære biologer . Firefly bio - luminescens - produsert av luciferase konvertering av luciferin til oxyluciferin - ble først identifisert , karakterisert og utviklet seg til luciferase reporter analysen av forskere ved University of California , San Diego i 1986 . Definisjoner
Deoksyribonukleinsyre (DNA ) fungerer som det genetiske materialet i cellene . En promoter sekvens av DNA styrer ekspresjonen av et gen - en sekvens av DNA som produserer et spesifikt protein . Som et eget stykke DNA , inneholder et plasmid et gen , for eksempel luciferase .
Metoder
En forsker konstruerer et plasmid som inneholder en promoter og luciferase genet. Dette plasmid transfekteres - innført biologisk , kjemisk eller mekanisk, - i en dyrecellelinje , og senere at cellen er brutt åpen for å slippe ut eventuell produsert luciferase . Luciferin tilsettes til denne celle blandingen, og mengden av bio- luminescens produsert av luciferase omdannelse av luciferin til oxyluciferin måles . Kits og detaljerte protokoller er kommersielt tilgjengelig for denne analysen .
Bruker
Mengden av bio - luminescens produsert i denne analysen er proporsjonal med styrken på promoter, og derfor tjener som en nyttig metode for å sammenligne forskjellige promotorer . Dette blir viktig i industrielle innstillinger , som er optimalisert arrangører kunne øke mengden av protein som produseres i samme tidsperiode.