Bakterier er nyttige verktøy i genmodifisering . Gjennom bruk av plasmider , kan sirkulære deler av utskiftbare bakteriell DNA , organismer, slik som andre bakterier, bli forvandlet genetisk . Denne guiden beskriver de grunnleggende metodene som er involvert i å bruke bakterier for genetisk engineering av en annen organisme . Du trenger:
Ikke-dødelige bakterier arter ( fortrinnsvis en ufarlig variant av Escherichia coli )
Andre ikke-dødelige bakterier arter
petriskål
Bakterier kuvøse
restriksjonsenzymer for målgenet
2 Sterile sløyfer
Varmt vannbad
Test tube
Vis flere instruksjoner
Forbereder genet av interesse
en
Skaff en prøve av de første bakteriene arter ved swabbing vedlagte koloni med en steril løkke .
2
Wave inokulert sløyfe i et reagensrør gjennom et vannbad ved ca 48 grader Celsius i fem sekunder .
3
Tilsett noen milliliter restriksjonsenzym i testrøret og oppvarmet , inokulert sløyfe . Denne begrensningen enzymet varierer avhengig av genet av interesse som vil bli overført til andre bakteriearter .
Transformasjon av andre bakterier Arter
4
Dypp en annen steril løkke inn en koloni av de andre bakterier arter , den som er å bli forvandlet .
5
spre bakterier jevnt over en petriskål inneholder agarose medium ved å skyve inokulert sløyfe over agarose .
6
La bakterier ruge i to dager i en inkubator , slik at bakterielle kolonier dannes.
7
Legg blandingen opprettet tidligere inneholder genet av interesse for petriskål inneholder bakterielle kolonier .
8
La bakterier ruge i to dager i kuvøse. Dette gjør arten til opptak genene lagt til parabolen og sette dem inn i sine genomer .
9
Utarbeide en metode for å teste de transformerte bakterier for å se om de assimilert genene . Hvis for eksempel genet tilsatt tilskudd den bakterier antibiotisk resistens , kan det være hensiktsmessig å legge skiver av ampicillin til agarplate . Hvis de overlever , tok de opp genet .